丹参
(SaluiamiltiorrhizaBunge.)为唇形科多年生草本植物,是我国传统中药材,以其根入药,含有多种生物活性物质,其主要化学成分为丹参酮等化合物,具有祛痰止痛、活血通络、清心除烦的功效,能显著增加冠脉流量,已广泛用于治疗冠心病、心绞痛、月经不调等症。
丹参的传统分根或芦头繁殖法不仅繁殖速度缓,而且品质容易退化,使产量下降。为加快丹参种苗的繁殖,梁红()、赵洁()、张跃非、雷家容()、雷开荣()等先后进行了丹参组培快繁的研究,并获得成功,为丹参优良品系大面积推广提供了种苗保证。现将丹参组培快繁技术介绍如下。
1.培养条件
培养基:
①MS+6-BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L+6.0%蔗糖;
②Ms+6-BA1.0mg/L+3.0%蔗糖;
③MS+NAA2.0mg/L+IAA0.2mg/L+3.0%蔗糖。
上述培养基中琼脂均为0.7%,pH5.8~6.0。培养温度为23~26℃,每天光照14h,光照强度lx。
2.无菌材料的获得
从生长健壮、无病虫害的丹参植株上切去5cm带顶芽的茎段,除去叶片,置烧杯中用自来水冲洗30min,取出后在超净工作台上用70%~75%乙醇表面消*10s,再用0.1%HgCl2溶液消*15min,无菌水冲洗2~5次,小心剥去茎生长点约1mm,接种在培养基上。
获选无菌斑、无损伤的健康饱满南欧丹参种子,倒入经灭菌处理的三角瓶中,70%乙醇处理15s,再用0.1%HgCl2处理15min,无菌水漂洗4次:将灭菌后的种子转入无菌培养皿中,用无菌滤纸吸干多余的水分后,播于MS固体培养基上,每瓶播种10粒;放于26℃±2℃培养室内培养,5d后种子开始萌动,25~40d后无菌苗可达8~10cm。切去无菌苗上部3个单节茎段(切去叶子及叶柄)作为外植体。
3.丛生芽的诱导及继代培养
外植体接种在培养基①上,约20d茎尖生长点开始萌动,同时在芽的基部四周出现*白色较致密的愈伤组织,继续在培养基①上生长30d左右即可分化出丛生芽。这些丛生芽在培养基①上繁殖速度快,但生长势弱。若将丛生芽转接到培养基②,通过30d左右的培养,这些小芽则生长旺盛、健壮。此时,再将丛生芽切割并转接到新的培养基②上进行继代增殖,将获得大量丛生芽;一般30d可继代1次,增殖率可达5~8倍。
4.生根与移栽
当芽丛长至1~2cm时,将其切割成1.0cm左右带1个腋芽的茎段,转接到培养基③上;经培养10d左右,茎段基部切口处产生多个白色根状突起,随着培养时间的延长而逐渐生成小苗:培养15d左右每株小苗基部即可长出5~6条2cm左右长的白根。生根诱导率可达95%以上。
当试管苗长至5cm左右时,将瓶苗移至走廊或普通房间,在散射灯光下炼苗3~4d,再开瓶炼苗2~3d;然后加入适量的清水以软化培养基,用镊子小心夹出小苗,并轻轻地洗去其根部的培养基;再将其移栽到用0.15%多灵菌预处理的泥炭土和沙泥(2:1)的混合基质中,覆膜保温、保湿,温度控制在25℃左右,每3~4d用清水喷洒1次,10d后移栽试管苗即开始正常生长,30d后移栽成活率达90%以上,且苗生长健壮。
编者按:本文来自陈绍煌主编《药用植物组培快繁实务》,中国林业出版社,由小编整理发布,如有不妥,敬请告知!
预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇